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我們時(shí)常會(huì)碰到的免疫組化常見問題

點(diǎn)擊次數(shù):14706   發(fā)布時(shí)間:2016/5/20 9:25:55

免疫組化是利用抗原與抗體特異性結(jié)合的原理,通過化學(xué)反應(yīng)使標(biāo)記抗體的顯色劑 (熒光素、酶、金屬離子、同位素) 顯色來確定組織細(xì)胞內(nèi)抗原(多肽和蛋白質(zhì)),對其進(jìn)行定位、定性及定量的研究。
抗體的保存:
抗體儲(chǔ)存容器應(yīng)由不吸附蛋白質(zhì)的材料制成,常用的有聚丙烯,聚碳酸酯和硼硅酸玻璃。
如儲(chǔ)存的抗體中蛋白濃度很低(10-100mg/L),就應(yīng)另加隔離蛋白以減少容器對抗體蛋白的吸附,隔離蛋白常用0.1%-1.0%的牛血清白蛋白。絕大多數(shù)已稀釋的抗體應(yīng)存在4℃-8℃條件下,以免凍融對抗體蛋白產(chǎn)生有害效應(yīng)?贵w原液和已分離的免疫球蛋白組分應(yīng)保存于-20℃條件下,并避免反復(fù)凍融。冷凍的抗體溶液應(yīng)置于室溫中緩慢地解凍,應(yīng)絕對避免用高溫快速解凍。被細(xì)菌污染的抗體常會(huì)出現(xiàn)假陽性結(jié)果,應(yīng)將污染的抗體溶液及其他試劑棄之。為防止細(xì)菌污染,可于抗體溶液中加入0.01%疊氮鈉?贵w經(jīng)真空冷凍干燥后置-20℃以下可保存3-5年。保存稀釋后的單抗應(yīng)加入0.1%疊氮鈉濃度。大多數(shù)稀釋抗體可進(jìn)行冷凍保存,少數(shù)抗體可能會(huì)丟失抗原活性。大多數(shù)單抗,只要蛋白濃度適當(dāng),可在4℃下保存數(shù)月。

原創(chuàng)作者:上海恒遠(yuǎn)生物技術(shù)發(fā)展有限公司

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