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恒遠(yuǎn)生物|Elisa試劑盒使用中常見的抗凝劑有哪些？

點擊次數(shù)：14487 發(fā)布時間：2022/5/31 16:24:37

Elisa試劑盒的檢測范圍以ng/ml計。而常見的科研試劑盒中的樣本中的目標(biāo)蛋白，范圍可隨樣本的類型而變化。所以實驗應(yīng)通過文獻(xiàn)和預(yù)實驗的方法確定樣本是否在所購的范圍內(nèi)，是很重要的步驟。

Elisa試劑盒常見的樣本處理方法：

血清：將收集于血清分離管的全血標(biāo)本在室溫放置 2 小時或 4 度過夜，然后1000×g 離心20分鐘，取上清即可。這是一個讓血液自然凝固的過程，溫度越低，凝集越緩慢，可根據(jù)需要添加促凝劑。

　　血漿：血漿樣本需要抗凝，一般建議用2.0%EDTA，1%肝素，3.8%C6H5Na3O7作為抗凝劑采集標(biāo)本，并將標(biāo)本在采集后的30分鐘內(nèi)于2~8度1000g離心15分鐘，取上清即可檢測。根據(jù)待檢測目標(biāo)物的性質(zhì)不同選取不同的抗凝劑。

　　C6H5Na3O7(檸檬酸鈉)：Ca2+有凝血作用，能與血液中的鈣離子形成可溶性的螯合物，從而阻止血液凝固。配成 109mmol/L的濃度和血液1:9, 106mmol/L的濃度和血液1:4

　　缺點：血液中溶解度低，抗凝作用較弱。

　　優(yōu)點：對凝血因子有很好的保護(hù)作用，大部分凝血試驗都可用C6H5Na3O7抗凝。

　　二胺四乙酸(EDTA)鹽：與血液中的鈣離子結(jié)合形成配位化合物，從而阻止血液凝固。15g/L EDTA和血液 1:10

　　優(yōu)點：對紅細(xì)胞和白細(xì)胞形態(tài)影響小。

　　缺點：影響血小板的聚集。不適用于凝血實驗和血小板功能相關(guān)實驗的檢測。

　　肝素：通過與抗凝血酶Ⅲ結(jié)合，增強抗凝血酶的作用，滅活絲氨酸蛋白酶，從而可阻止凝血酶的形成和阻止血小板聚集，阻止血液凝固。肝素鈉 1g/L 與血液 1:10

　　優(yōu)點：抗凝能力強、不影響血細(xì)胞體積、不易溶血、能耐高溫。

　　缺點：引起白細(xì)胞聚集。肝素抗凝血應(yīng)于短時間內(nèi)使用，否則放置過久血液又可凝固。

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